Caracterización molecular y funcional de los complejos tetraspaninas/integrinas en la adhesión intercelular y la migración de células epiteliales y endoteliales humanas

Resumen

En este trabajo de investigacion hemos abordado el estudio de la posible implicacion funcional de los complejos tetraspaninas/integrinas en las uniones intercelulares y en los procesos de adhesion y migracion de celulas endoteliales, queratinocitos y celulas epiteliales. En primer lugar nos planteamos la identificacion y caracterizacion molecular y funcional de nuevos receptores de uniones intercelulares de celulas endotelilales mediante la generacion de anticuerpos monoclonales especificos frente a celulas endoteliales de cordon umbilical humanas. Asi caracterizamos a la tetraspanina CD151, que forma complejos multimoleculares con las tetraspaninas CD9 y CD81 y con la integrina alfa3beta1 y que se localizan en las uniones intercelulares de celulas adherentes (endoteliales y epiteliales). Estudiados funcionales indican que los complejos tetraspaninas/integrina alfa3beta1 intervienen en la migracion de las celulas endoteliales y los queratinocitos humanos asociada a procesos de reparacion de heridas y reendotelizacion. A continuacion estudiamos la respuesta de distintos antigenos de uniones intercelulares endoteliales al peptido vasocativo Angiotensina II. La Ang II induce especificamente la redistribucion subcelular de la integrian alfa3beta1 y de las tetraspaninas CD9 y CD151 asociadas sin afectar a otros antigenos de uniones intercelulares ni la funcion de barrera de la monocapa endotelial. Esta recolizacion puede ser responsable del fenotipo angiogenico inducido por la Ang II a traves de su receptor AT1 en celulas endoteliales, puesto que en un modelo in vitro con celulas endoteliales aisladas inhibimos el efecto proangiogenico de Ang II con anticuerpos especificos frente a la cadena alfa3 de las integrinas. El estudio de la distribucion de antigenos de la superfamilia de las tetraspaninas en celulas epiteliales polarizadas nos permitio caracterizar el estado conformacional de las integrinas aso