INFECCIÓN PERITONEAL POSTOPERATORIA Y RECURRENCIA DEL CÁNCER COLORRECTAL: ESTUDIO DE LA CAPACIDAD DE PROLIFERACIÓN, MIGRACIÓN E INVASIÓN DE CÉLULAS TUMORALES IN VITRO COMO MECANISMOS RESPONSABLES DE ESTA ASOCIACIÓN

Resumen

La dehiscencia de anastomosis despues de cirugia de cancer colorrectal (CCR) se asocia a una mayor recurrencia tumoral. Sin embargo, los mecanismos responsables de esta asociacion son aun desconocidos. En un trabajo previo demostramos que la respuesta inflamatoria y angiogenica secundaria a la infeccion peritoneal tras cirugia de CCR es mayor que en los pacientes que no presentan ninguna complicacion postoperatoria. Esta respuesta amplificada podria tener un efecto negativo en los pacientes con CCR. Otro de los mecanismos que podria explicar esta asociacion seria la adquisicion de un fenotipo invasivo de celulas tumorales residuales en presencia de infeccion. El primer objetivo de este proyecto de investigacion fue confirmar nuestros resultados previos y ampliar el estudio a otras citoquinas inflamatorias y angiogenicas. En segundo lugar, investigamos el efecto de la infeccion peritoneal tras cirugia de CCR sobre la proliferacion, migracion e invasion de lineas celulares de cancer in vitro. Se realizo un estudio prospectivo de cohortes con controles apareados en pacientes intervenidos de CCR con intencion curativa. Los pacientes que presentaron un absceso intraabdominal o una dehiscencia anastomotica fueron incluidos en el grupo infeccion. Tambien se selecciono otro paciente sin ninguna complicacion postoperatoria para el grupo control. Las variables de apareamiento fueron sexo, edad, localizacion tumoral, abordaje quirurgico, estadio tumoral y tratamiento neoadyuvante en los pacientes con cancer de recto. Se obtuvieron muestras de sangre y liquido peritoneal antes de la cirugia y al cuarto dia postoperatorio o en el momento del diagnostico de la infeccion. Se analizaron 43 citoquinas inflamatorias y angiogenicas en las muestras de suero postoperatorias mediante arrays de anticuerpos. Los ensayos in vitro consistieron en el cultivo de celulas tumorales MDA-MB-231 y SW620 que se trataron con muestras de suero y liquido peritoneal preoperatorias y postoperatorias. Los ensayos de proliferacion, migracion e invasion realizados se basaron en el metodo colorimetrico en el cual se utiliza la actividad de la enzima hexosaminidasa como cuantificacion del numero de celulas viables. Durante el periodo de estudio, 47 pacientes fueron incluidos en el grupo infeccion con sus correspondientes controles. Todas las citoquinas analizadas fueron significativamente mayores en el grupo infeccion. Las muestras de suero postoperatorias de pacientes del grupo infeccion mostraron un aumento significativo de la proliferacion de celulas MDA-MB-231. Este efecto fue mas evidente cuando comparamos la diferencia de proliferacion entre muestras postoperatorias y preoperatorias, entre grupos. Ademas, observamos una mayor induccion de la migracion celular en el grupo infeccion al aplicar muestras de suero postoperatorio aunque no encontramos diferencias de actividad celular invasiva entre grupos. No hallamos diferencias de proliferacion celular entre grupos al tratar las celulas con muestras de liquido peritoneal postoperatorias. Sin embargo, algunas de estas muestras mostraron un efecto citotoxico no relacionado con la presencia de infeccion. Las muestras postoperatorias de liquido peritoneal del grupo infeccion mostraron un incremento significativo de la migracion de celulas MDA-MB-231 y de la invasion de celulas SW620. Este efecto tambien se observo al comparar las diferencias entre muestras postoperatorias y preoperatorias entre ambos grupos. La supervivencia libre de enfermedad fue significativamente menor en el grupo infeccion. La infeccion peritoneal postoperatoria se asocio a recurrencia tumoral. El riesgo de padecer una recurrencia tumoral fue casi tres veces mayor si se sufrio una infeccion peritoneal postoperatoria en nuestra muestra de pacientes. En conclusion, la expresion de citoquinas inflamatorias y angiogenicas despues de cirugia de CCR es mayor en presencia de infeccion peritoneal. La infeccion peritoneal postoperatoria estimula la proliferacion, migracion e invasion de las celulas tumorales in vitro. Estos mecanismos podrian ser responsables, al menos en parte, de la asociacion entre la infeccion peritoneal y la recurrencia tumoral tras la cirugia del CCR.