Invasión, migración y dinámica del citoesqueleto de células de linfoma mediadas por CDCA7

Resumen

La metastasis es la principal causa de muerte por cancer. Las metastasis originadas por neoplasias linfoides, en particular,son extremadamente dificiles de tratar, debido a su heterogeneidad y a su frecuente afectacion del sistema nervioso central. La adquisicion del potencial metastasico va acompanada de un incremento de las capacidades de migracion e invasion de las celulas cancerigenas. A pesar de la relevancia de estos procesos, los mecanismos y genes involucrados en la formacion de metastasis linfoides son poco conocidos. La inmortalidad es una caracteristica esencial, pero no suficiente para la tumorogenesis. De hecho, algunas celulas no tumorales, como las lineas celulares linfoblastoides (LCLs), son capaces de proliferar ilimitadamente. Para identificar genes implicados en caracteristicas tumorales mas alla de la inmortalizacion, nuestro grupo comparo los perfiles de expresion genica de celulas de linfoma, con los de LCLs. Entre >1.600 genes diferencialmente expresados en celulas de linfoma, focalizamos nuestro estudio en CDCA7, como uno de los genes regulados de manera mas significativa. CDCA7 se identifico como un gen diana de C-MYC, cuyo mRNA se sobreexpresaba en tumores humanos, particularmente en muestras de leucemia cronica. Diversos estudios sugirieron, sin embargo, que CDCA7 poseia una capacidad transformante in vivomuy limitada. Ademas, su expresion forzada inhibia la transformacion inducida por C-MYC. En contraste, nuestro grupo recientemente mostro que el silenciamiento de CDCA7 en celulas de linfoma y leucemia reducia notablemente su capacidad tumorogenica, sin afectar la proliferacion de celulas no tumorales. En el trabajo presentado en esta Tesis Doctoral hemos investigado la participacion de CDCA7 en la invasion y migracion de celulas de linfoma. Mediante la inoculacion subcutanea de celulas de linfoma de Burkitt en ratones inmunodeprimidos, observamos que el silenciamiento de CDCA7 redujo el crecimiento tumoral. El posterior analisis histologico de los tumores revelo que, a diferencia de las celulas control, las celulas silenciadas apenas infiltraron y desorganizaron los tejidos circundantes. Ademas, utilizando un modelo de xenotransplante en embriones de pez cebra, observamos que el silenciamiento de CDCA7 redujo marcadamente la invasion de las celulas de linfoma. Ensayos de invasion y migracion in vitro, empleando placas permeables transwell, confirmaron que, al silenciar CDCA7 en las lineas de linfoma DG-75, BL-2 y Toledo, se redujo su capacidad invasiva y migratoria. La investigacion de los mecanismos implicados revelo que el silenciamiento de CDCA7 altero la polarizacion de los citoesqueletos de actomiosina y tubulina, y que el incremento de la polimerizacion de actina y de la fosforilacion de la cadena ligera de miosina eran esenciales para inhibir la capacidad migratoria de las celulas por CDCA7. En conjunto, nuestros resultados sugieren con firmeza que CDCA7 es un mediador critico de la invasion y migracion de las celulas de linfoma a traves de la regulacion de la dinamica de los citoesqueletos de actomiosina y tubulina.