Papel del shh en la migración de los precursores de oligodendrocitos durante el desarrollo

Resumen

El morfogeno Sonic Hedgehog (Shh) es una proteina con numerosas acciones en procesos fundamentales para el desarrollo embrionario. En este trabajo se describe su participacion en la migracion y proliferacion de los precursores de oligodendrocitos (POs) del nervio optico en embriones de raton, la presencia de su receptor Megalina en los astrocitos del nervio optico asi como la accion de este receptor sobre los efectos que Shh tiene sobre los POs. Utilizando tecnicas de hibridacion in situ y de inmunohistoquimica se identifico la fuente del morfogeno en la retina tanto a E14,5, momento en el que comienza la colonizacion del nervio optico por los POs, como a E16,5 y E18,5, momento en el que se considera que los POs han colonizado completamente el nervio optico. Utilizando co-cultivos de explantes de nervio optico de embriones (E16,5) con esferas recubiertas de Shh, explantes de retina de E16,5 y explantes de placa del suelo de E12,5, ademas de cultivos en camaras de quimiotaxis, se ha descrito que Shh tiene un efecto quimioatrayente sobre los POs. Este efecto fue suprimido por completo por el anticuerpo bloqueante de Shh (5E1) pero se mantuvo a pesar de la adicion del bloqueante de los receptores Ptc-Smo ciclopamina. Los estudios de incorporacion de BrdU han mostrado que Shh a E16,5 tiene un efecto mitogenico sobre los POs del nervio optico. Este efecto sobre la proliferacion se anulo tanto con la adicion del anticuerpo 5E1 como con la adicion del bloqueante ciclopamina. Finalmente, a E18,5 Shh no mostro ningun efecto quimioatrayente ni proliferativo sobre los POs del nervio optico in vitro. Utilizando tecnicas de hibridacion in situ se ha descrito que el receptor Megalina esta presente en zonas de oligodendrogenesis hasta E16,5. A esta edad se puede localizar por inmunohistoquimica tanto en las celulas ganglionares de la retina como en los astrocitos del nervio optico. Utilizando las camaras de quimiotaxis se ha comprobado que el bloqueo del receptor Megalina impide que Shh ejerza su efecto quimioatrayente sobre los POs a E16,5 in vitro.