Control epigenético-microarn de la migración de las células de la cresta neural en vertebrados

Resumen

Las celulas de la cresta neural (CCN) conforman una poblacion transitoria presente solo en etapas muy tempranas del desarrollo embrionario de vertebrados. Estas celulas se caracterizan por su multipotencia y capacidad migratoria, y es sabido que defectos en el proceso de migracion lleva a severos trastornos congenitos conocidos como neurocristopatias. Las CCN, para adquirir sus propiedades migratorias, sufren un proceso de transicion epiteliomesenquima (TEM), similar a lo que ocurre durante el inicio de la metastasis tumoral. Se ha determinado que los microARNs conforman un grupo de reguladores claves de la TEM tumoral. Considerando lo dicho, nos planteamos como objetivo determinar la existencia de una red regulatoria epigeneticamicroARN que desempene un papel importante en la migracion de las CCN. Es asi que, mediante analisis in silico, se encontro que los reguladores claves de la TEM en las CCN, tales como son los genes PHD12 y Snail2, son blancos tentativos del mismo miR-203. Al analizar la expresion de miR-203 mediante hibridacion in situ y RT-qPCR se observo que se expresa fuertemente desde estadios muy tempranos en la placa neural y el tubo neural. Sin embargo, su expresion disminuye en el tubo neural dorsal coincidentemente con el inicio de la migracion de las CCN. Por otra parte, se observo mediante secuenciacion por bisulfito, que la region genomica de miR-203 se encuentra hipermetilada en las CCN pre-migratorias, a diferencia de la hipometilacion encontrada en las celulas del tubo neural ventral y CCN migratorias. Finalmente, la perdida de funcion de miR-203, utilizando un vector “esponja” de microARNs, lleva a una migracion prematura de las CCN. Estos resultados en conjunto indican que la inhibicion de la expresion de miR-203, mediante metilacion del ADN, permite el aumento de la expresion de los genes PHD12 y Snail2 los cuales estan directamente involucrados en la TEM de las CCN. Los resultados obtenidos en este proyecto pueden tener grandes implicancias que permitiran tener un mayor entendimiento sobre los errores que pueden conducir a un desarrollo anormal, asi como tambien para comprender la metastasis tumoral.